Equipamentos
O princípio básico da cromatografia é a separação de misturas, no qual as substâncias a serem separadas são distribuídas entre duas fases: uma fase estacionária e uma fase móvel.
A cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) ou em inglês, High Performance Liquid Chromatography (HPLC), tem sido amplamente utilizada na análise de separação, identificação e quantificação de compostos ativos.
Os principais componentes de um HPLC são:
Como se faz a identificação de um composto por HPLC?
O tempo de retenção varia de acordo com as interações das substâncias presentes na amostra com as fases estacionária e móvel, por isso, cada composto será eliminado da coluna e identificado pelo detector em um tempo diferente, gerando um pico cromatográfico.
A análise dos diferentes picos nos permite identificar e quantificar as substâncias presentes na amostra.
Detector por Índice de Refração (RI)
Também chamado de refratômetro diferencial, este sistema é conhecido como detector universal por apresentar respostas para qualquer espécie de amostra.
Como funciona o Detector de RI?
A análise baseia-se na mudança do índice de refração do eluente por causa dos componentes da amostra. Quanto maior a diferença do índice de refração entre a fase móvel e o componente da amostra, mais intenso é o sinal.
Este detector possui como principais características:
Os detectores de índice de refração são empregados quando outros disponíveis não respondem aos compostos de interesse e a sensibilidade não for muito importante, como por exemplo, em separações preparativas e em análises de macromoléculas em cromatografia de exclusão por tamanho.